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肺癌药物筛选细胞株的建立  

2016-09-23 09:52:13|  分类: 默认分类 |  标签: |举报 |字号 订阅

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美迪西拥有一支超过百余名的化学家队伍,有着和国内外知名的大型制药公司和生物技术公司进行新药研发合作的经验。在国际知名和经验丰富的药物化学领军人才的领导下,美迪西为客户提供涵盖各种靶标和疾病领域的新药研发服务,包括从活性化合物发现, 靶标验证,先导化合物优化到临床前候选药物的选择。联系我们:marketing@medicilon.com.cn 网站:www.medicilon.com.cn.

ABSTRACT:本发明属于细胞生物学领域,公开了一种人肺癌细胞株;本发明还公开了该细胞株的构建方法及用途。所述的人肺癌细胞株具有高染色体整合度、高荧光强度、遗传性状稳定且对肺癌药物敏感的特点,是一种理想的研究肺癌药物筛选的模型。

技术领域:本发明属于细胞生物学领域,特别是涉及一种可用于肺癌药物筛选的细胞株的建立。

背景技术: 肺癌是严重威胁人类健康的疾病,也是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。我国的 肺癌发病人数占全世界的第一位,且呈上升趋势。尽管到目前为止,已有数十种肺癌药物 (包括核酸类药物、小分子药物、蛋白类药物等)可以用于临床治疗,但大多数肺癌药物都 只能使病情缓解,无法做到根治。因此,迫切需要筛选出新的有效的肺癌药物。

高通量药物筛选是目前世界上最流行的药物研发手段,而高通量药物筛选平台的建立则需依靠高通量筛选模型的实现。由于细胞水平的药物筛选模型具有材料用料少,药物作用机制明确,可实现大规模筛选等特点,已被广泛应用于肺癌药物筛选和机理研究中,然而,纵观国内外的人肺癌细胞药筛模型,尚缺乏一种对肺癌药物敏感、可在体内外长期稳定表达、实验重复性能高、荧光标记的肺癌细胞系,以满足肺癌新药快速筛选所需。

发明内容:本发明的目的旨在提供一种新的可用于肺癌药物筛选的转基因细胞株。

本发明的第一方面是提供了一种可表达慢病毒载体携带的抗生素抗性基因和报 告基因的人肺癌细胞株。

在另一优选例中,所述人肺癌细胞株可用于筛选治疗或者预防肺癌的药物;所述治疗或者预防肺癌的药物为单克隆抗体或核糖核酸。

在另一优选例中,所述人肺癌细胞株可由如下方法制得:

(1)用携带有抗生素抗性基因和报告基因的慢病毒载体转染人胚肾293T细胞,获得真核表达抗生素抗性基因和报告基因的假慢病毒颗粒;

(2)将(1)中得到的假慢病毒颗粒感染人肺癌H1299细胞,经抗生素筛选得到。

在另一优选例中,所述慢病毒载体为HIV-I载体系统。

在另一优选例中,所述抗生素为嘌呤霉素。

在另一优选例中,所述报告基因为eGFP

在另一优选例中,所述人肺癌细胞株为人肺癌H1299细胞。

本发明的第二方面是提供了一种制备可表达慢病毒载体携带的抗生素抗性基因和报告基因的人肺癌细胞株的方法,包括如下步骤:

(1)用携带有抗生素抗性基因和报告基因的慢病毒载体转染人胚肾293T细胞,获得真核表达抗生素抗性基因和报告基因的假慢病毒颗粒;

(2)将(1)中得到的假慢病毒颗粒感染人肺癌H1299细胞,经抗生素筛选得到。

在另一优选例中,所述慢病毒载体为HIV-I载体系统。

在另一优选例中,所述抗生素为嘌呤霉素。

在另一优选例中,所述报告基因为eGFP

在另一优选例中,所述人肺癌细胞株为人肺癌H1299细胞。

本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述,本发明的特点、目的和优势将更为明显。

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